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GIBCO原裝胎牛血清10270-106行貨*|功能

發布時間:2018-10-31瀏覽:2950次

GIBCO原裝胎牛血清10270-106行貨*|功能 原裝,慧穎生物提供COA質檢報告以及其他相關資料,充足干冰運輸,當日或次日發貨。

胎牛血清功能

1.提供對維持細胞指數生長的激素,基礎培養基中沒有或量很少的營養物,以及主要的低分子營養物。

2. 提供結合蛋白,能識別維生素、脂類、金屬和其他激素等,能結合或調變它們所結合的物質活力。

3.有些情況下結合蛋白質能與有毒金屬和熱原質結合,起到解毒作用。

4.是細胞貼壁、鋪展在塑料培養基質上所需因子來源。

5.起酸堿度緩沖液作用。

6.提供蛋白酶抑制劑,使在細胞傳代時使剩余胰蛋白酶失活,保護細胞不受傷害。

7.內毒素極低,其次無菌過濾,后三次為0.1um無菌過濾處理。

8.進行細菌、真菌、支原體、病毒及病毒抗體檢測,符合動物協會要求

9.建議使用范圍:科研使用,細胞培養

10.儲存:-20℃凍存,避免反復凍融,4°C保存不超過1個月。反復凍融會破壞血清中有效成 分,影響血清品質。

胎牛血清、小牛血清、新生牛血清之間的區別:

1、采血時間不同:

胎牛血清(Fetal Bovine Serum)是在母牛懷孕5-8個月時,通過胎牛心臟穿刺采血獲取的血清。新生牛血清(Newborn Calf Serum)是來自剛出生~出生后2周內的新生牛靜脈取血。小牛血清(Calf Serum)采自出生后2周至1年內的小牛靜脈取血。

2、組份與比例不同:

兩者所含的促細胞生長因子、促貼附因子、激素及其他活性物質等組份與比例不同。胎牛血清尤其含有胚胎發育所必需的生長因子。一些生長因子到胎牛10個月時就消失了。

 3、用途與用法不同:

某些細胞必需胎牛血清才能生長,而有些細胞只需小牛血清即可。使用濃度一般在5%-10%,有特殊要求的濃度在20%。血清保存和使用須注意:血清應保存在-5℃至-20℃,若存放在4℃不可超過一個月。解凍血清時,推薦我們總結出來的三步法(見下表),可預防沉淀發生。不推薦血清4℃過夜融化,更不能直接將冷凍的血清放入37℃水浴或者溫箱中。因為血清在融化時,蛋白先融,冰塊后融,局部蛋白濃度過高,易發生沉淀。血清在解凍后,應按用量分裝并于-20℃保存,避免反復凍融。

關于細胞培養中的“黑膠蟲”:

在細胞培養中常可見到培養液中出現大小不等、形態不同的黑色顆粒。只要這種黑色顆粒一出現,我們的細胞不是停止生長就是陸續死亡。人們常稱這種顆粒為「黑膠蟲」。聽說,這種黑色顆粒還會「游動」?小編想想都雞皮疙瘩掉一地。難道真的是細胞長蟲子了嗎?

 

關于「黑膠蟲」的傳說:

 

分類

 

關于「黑膠蟲」的分類,學術界沒有明確給予說法。

 

1. 部分認為黑膠蟲污染是微生物感染,但是沒把它歸為某種特定的生物類型,目前「黑膠蟲」尚屬一種未知生物。根據中國病毒所和軍科院的鑒定,這可能是一種寄生于牛血清內的原蟲,似乎和草履蟲和變形蟲有類似之處,但是由于課題經費不夠而不能繼續下去,終也沒有有力證明黑膠蟲是否為原蟲;

2. 同時,另一部分學者不認為所謂的「黑膠蟲」是一種生物污染,而認為是細胞碎片,是在細胞培養時由于細胞凋亡或死亡產生的;

3. 此外,還有學者認為「黑膠蟲」是玻璃瓶中類似氧化硅的物質。

 

形態

 

直徑約 0.5-1 μm,顯微鏡觀察為黑色,線狀、桿狀或橢圓形,不同人員觀察到的形態不一致。

 

運動

 

顯微鏡下有典型的布朗運動(不規則的原地小距離抖動),即很多細胞培養者看到的,像黑色的小蟲游來游去。但是在物理學上來說,只要顆粒足夠小,即可在液體中呈布朗運動,因此,呈「布朗運動」并不足以說明「黑膠蟲」為生物體。

 

抗性

 

耐高溫高壓,抗細菌和抗霉菌的藥物對「黑膠蟲」無效,可以保守的判定「黑膠蟲」不屬于細菌、霉菌。

 

環境

 

可存在于細胞培養基中,可隨細胞傳代存在。

 

關于「黑膠蟲」的猜測

 

細胞碎片

 

隨著細胞培養的繼續,部分細胞開始衰亡,細胞膜結構破裂,破裂之后的細胞內容物泄露到培養液中。尤其是溶酶體的破壞,連續性地造成其他細胞和細胞器的損傷,如果換液不很勤,又會出現進一步破壞和殘渣的出現。 假設,這種黑點是某種生物,其大小及運動狀況達到了用顯微鏡可以觀察出的程度,那么其營養代謝和能量需求也就可想而知,培養液中的養分消耗、酸堿含量程度等都應發生明顯變化。然而,并沒有報道指出這些狀況出現在在所謂的「黑膠蟲」感染過程中,也沒有有力證據指出這種黑點的出現會對細胞狀態產生直接影響。當細胞狀態下降時,一些學者觀察到黑點明顯增多,這很有可能是細胞狀態下降時,細胞衰亡產生的細胞碎片。

 

氧化硅類似物

 

有報道稱,這種黑點其實不是一種生物,是無機物,其本質是玻璃培養瓶里的硅顆粒,會在一定程度上影響細胞生長。細胞狀態好時,不明顯;細胞狀態較差、數量較少時才容易看到,因此建議使用一次性培養瓶。

 

支原體

 

有人曾認為這種黑點可能是支原體污染,理由是它通過濾膜,但已有充分的證據顯示它并不是支原體:

 

1. 這種黑點光鏡下可見,支原體在光鏡下不可見。

 

2. 這種黑點在多種染色后可見,HOECHST 即能將它染色,而支原體用普通染色法不易著色,姬姆薩染色淺,革蘭染色為陰性。因此,「黑膠蟲」是支原體的可能性很小。

 

寄生蟲原蟲

 

有人認為這種黑點屬于寄生類的原蟲,在 400 倍以上的高倍鏡下可以清楚的看到這種黑點有兩種不同形態,一種較大,運動較慢;另一種較小,運動較快;個體小分布在大的周圍。同時,這種黑點的存在不依賴于活細胞。有人做過這樣的試驗,單純培養有黑點污染的血清,直到滿視野遍布大小不一的黑點。據說,病毒所和軍科院曾開展過相關研究,然而由于課題經費不足沒有繼續進行,目前,并沒有明確的證據顯示這種黑點為原蟲。

 

解析

 

從前面關于這種神秘的黑點的描述可以看出,人們遇到的黑點其實并不一樣,有像細胞碎片的、有像氧化硅的、有像支原體的、有像原蟲的等等。目前,國內各實驗室環境、器材條件參差不齊,實驗人員的操作質量也不盡相同,很多人發現細胞被細菌污染了,不好處理,而卻描述出來的現象和流傳的「黑膠蟲」類似,一傳十,十傳百,「黑膠蟲」被傳說的變得越來越神秘,對「黑膠蟲」的描述也五花八門,眾口不一。很多實驗人員細胞培養失敗,就會把失敗的原因歸結為有的黒膠蟲污染。其實,黑膠蟲是否存在,還有待于科學的發展。但有一點可以肯定的,大部分人發現的「黒膠蟲」并不是真正那個未知的黒膠蟲,而是常見的細菌、真菌、原蟲等微生物污染。

 

報道

 

在《細胞生物學雜志》中《對細胞培養中一種黑色運動顆粒性質的研究》論文,文中經過多種實驗驗證后指出:「在組織培養中常觀察到一種大小不等、形態不同的黑色運動顆粒,它對培養細胞的生長有不良影響,有時甚至導致細胞死亡,并能在一定條件下隨培養時間的增長而增加其數量。人們常稱這種顆粒為黑膠蟲或中毒顆粒,我們取細胞培養用的血清、培養基和其他材料中的黑色運動顆粒,應用光學顯微鏡、透射電鏡、掃描電鏡對其形態學進行系統觀察;并用顯微攝影觀察其活動情況;用紫外分光及電泳透析進行生化分析

 

結果證明:該顆粒為無膜式結構,無蛋白質成分,中性環境下帶正電荷,能譜掃描電鏡分析為硅復合物,我們稱之為硅小體,證明其活動屬布朗運動。本文進一步用電感耦合等離子發射光譜分析了培養液及雙蒸水中可溶性的硅含量在不同質量的容器及不同時間的變化,證明了硅小體的增多主要來源于培養液對玻璃器皿的侵蝕,或來源于被培養的細胞。

綜上所述,不管是黑膠蟲到底是什么物質,選擇一款高品質的胎牛血清會避免這種情況的一大半,如何選購高質量胎牛血清:

市場上的胎牛血清種類繁多,魚龍混雜,很多科研工作者,特別是剛接觸細胞培養的人,難以分辨胎牛血清質量的優劣。選購胎牛血清請注意以下幾點:

一、外觀

拿到胎牛血清,先接觸的是血清外觀,對于缺少細胞培養經驗的人來說,外觀的判斷尤為重要

 

1、顏色

根據血紅蛋白含量的不同,胎牛血清可表現出黃色或紅色,我國的細胞培養用血清標準是不高于20mg/dl,實際上,血紅蛋白含量的高低對血清并無直接影響,這個指標的意義在于能體現出采血過程的嚴謹規范程度,良好的操作能降低血清的溶血。

國產血清的采血點很分散,大多是由屠戶采血后馬上離心收集,所以很少會有溶血,表現出明亮的蠟黃色,當然,國產血清也很少有標準意義上的胎牛血清。

進口胎牛血清或多或少總有點溶血,因為真正的胎牛血清凝血功能差,紅細胞容易破裂。

2、沉淀

很多血清客戶,會發現進口血清有沉淀,從而懷疑血清的質量問題,這是沒有根據的。

血清中的沉淀是由纖維蛋白的凝聚產生,對血清質量沒有任何影響,沉淀的產生原因很多,和廠家的加工生產方式密切相關。

國產的血清,大多來自北方,由于價格低廉,保存環境都不好,從采血、冷凍、運輸到生產會經過多次凍融,每次凍融過程,就會析出部分纖維蛋白沉淀,這樣,血清成品過濾后看起來反而更加的“干凈”,很少有沉淀產生。

進口的胎牛血清,過濾分裝前很少會反復凍融,生產后的成品也是清澈的,但隨著時間的推移,血清中的大量纖維蛋白會析出形成沉淀。當然,進口的新生牛血清,一般牛齡都在2周左右,血清中的各種蛋白含量明顯偏高,生產后血清可能會渾濁,甚至有大量沉淀。

當然,購買回來的血清都是冰凍狀態,使用時需要融化,融化過程在溫度較低的狀態下慢慢進行,否則沉淀相對較多,雖然沉淀并不直接影響血清的質量,但對細胞的顯微觀察有一定的阻礙。

3、澄清度

進口胎牛血清由于蛋白和脂類等物質含量低,表現為稀薄、清淡,而國產血清,因為絕大多數是新生牛血清,相對而言更加粘稠,顏色略深,這對于初步接觸血清的人很難判斷,但把兩者進行對比,可容易分辨。

 

二、主要技術指標

 

目前國內血清的質量標準是2005版的《中華人民共和國藥典》,主要指標有以下幾點:

 

1、內毒素

標準為不高于5EU/ml。內毒素是細菌破碎后細胞壁的成分,因此內毒素含量的高低可表現出采血到生產一系列過程中的無菌操作情況。

2、總蛋白含量

胎牛血清一般范圍是30-40mg/ml,數值偏高,說明采血的牛齡偏大,不是胎牛,數值偏低,表明血清可能摻水了。

3、血紅蛋白

標準為不高于20mg/dl,顏色越紅,數值越高,反之,數值越低。

4pH

國產血清,大多高于7.5,進口胎牛血清,大多低于7.5,具體原因未知,可能和牛齡有關,這也能用來初步鑒別血清的來源。

5、微生物

包括細菌、霉菌、支原體、噬菌體、各類病原性病毒等。隨著國內血清廠家生產條件的改善提高,細菌、霉菌等“大型”微生物幾乎能100%控制,支原體經過0.1um過濾,大多也能清除。大腸桿菌噬菌體的污染還是比較嚴重的,主要是生產環境過程中帶入,又無法過濾,很難*清除,但對血清質量影響不大。病原性病毒,特別是BVDV,在國產血清中幾乎90%以上都存在,這類微生物是影響國產血清質量的重要因素之一,而進口胎牛血清中基本都控制的很好。

6、免疫球蛋白

國產血清的只是定性檢測,結果也很不準確,進口胎牛血清大多定量檢測。免疫球蛋白的數值能*體現出采血的時的牛齡情況,國產血清,基本都是新生牛的,血清中容易產生IgMIgG的含量也偏高,進口胎牛血清,不含IgMIgG的含量也較低。

7、其它

不管是國產還是進口血清,都是不測抗生素的(無四環素胎牛血清除外)。國外,抗生素的使用很嚴格,用量也很少,每頭奶牛的產品包括血清都可以溯源的,因此可以做到胎牛血清中不含抗生素或含量極低;國內,抗生素的濫用已成了普遍現象,血清中殘留很高,對細胞培養極為不利,這是國產血清質量差的根本原因。

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Gibco優等胎牛血清FBS         10437-028        Mexico   500ML

Gibco優等胎牛血清FBS         10099-141        AUSTRALIA       500ML

Gibco特級胎牛血清FBS         16000-044        USA  500ML

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Gibco熱滅活胎牛血清FBS heat inactivated          10082-147        USA  500ML

Gibco熱滅活胎牛血清FBS heat inactivated          10100-147        AUSTRALIA       500ML

Gibco超低IgG胎牛血清Ultra-low IgG FBS  16250-078        USA  500ML

Gibco透析胎牛血清Dialyzed FBS 264000-044      USA  500ML

Gibco活性炭/葡聚糖處理胎牛血清Charcoal Stripped FBS 12676-029        USA  500Ml

Gibco新生牛血清New born calf serum        16010159         New Zealand   500ML

Gibco馬血清Horse Serum     16050-122        New Zealand   500ML

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