3T3-L1細胞/ 3T3-L1小鼠前脂肪胚胎成纖維細胞      培養步驟

產品名稱：3T3-L1細胞

中文名稱：小鼠前脂肪胚胎成纖維細胞；3T3-L1

規格：T25

形態特征：3T3-L1是從3T3細胞（Swissalbino）中經克隆分離得到的連續傳代的亞系。該細胞從快速分裂到匯合和接觸性抑制狀態經歷了前脂肪細胞到脂肪樣細胞的轉變。該細胞鼠痘病毒陰性；可產生甘油三酯，高濃度血清可增強細胞內脂肪堆積。

生長狀態：成纖維細胞樣

特征特性：貼壁生長

培養條件：DMEM(高糖）+10%FBS（推薦HAKATA優等胎牛血清貨號：HN-FBS-500）

傳代方法：1：2傳代

凍存條件：HAKATA ® 無血清細胞凍存液 貨號：H-W-100 規格：100ML

支原體檢測：陰性

使用權限：A類

參考文獻：

供應商：上海慧穎生物科技有限公司

復蘇周期：10個工作日左右

培養步驟：

1）復蘇細胞：將含有1mL細胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍，加入5mL培養基混合均勻。在1000RPM條件下離心5分鐘，棄去上清液，補加4-6mL*培養基后吹勻。然后將所有細胞懸液加入培養瓶中培養過夜（或將細胞懸液加入6cm皿中），培養過夜。第二天換液并檢查細胞密度。

2）細胞傳代：如果細胞密度達80%-90%，即可進行傳代培養。

1、對于貼壁細胞，傳代可參考以下方法：

1. 棄去培養上清，用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細胞1-2次。

2. 加1-2ml消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培養瓶中，置于37℃培養箱中消化1-2min，然后在顯微鏡下觀察細胞消化情況，若細胞大部分變圓并脫落，迅速拿回操作臺，輕敲幾下培養瓶后加5ml以上含10%血清的*培養基終止消化。

3.輕輕吹打細胞，*脫落后吸出，在1000RPM條件下離心8-10分鐘，棄去上清液，補加1-2mL培養液后吹勻。

4. 按5-6ml/瓶補加培養液，將細胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含5-6 ml培養液的新皿中或者瓶中。

PS：若客戶收到2ml小管細胞，收到細胞后，用75%酒精噴灑整個管子消毒后放到超凈臺或安全柜內，嚴格無菌操作；將小管細胞轉移至T25培養瓶或6cm培養皿，加入5ml左右*培養基混勻，放入培養箱過夜培養后查看細胞密度：若密度未超過80%，換液繼續培養，視情況傳代或者凍存。若密度超過80%，可直接進行傳代（方法同上）。

2、對于懸浮細胞，傳代可參考以下方法：

方法一：收集細胞，1000RPM條件下離心8-10分鐘，棄去上清液，補加1-2mL培養液后吹勻，將細胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養基的新皿中或者瓶中。

方法二：可選擇半數換液方式，棄去半數培養基后，將剩余細胞懸起，將細胞懸液按1：2到1：3的比例分到新的含8ml培養基的新皿中或者瓶中。

3）細胞凍存：待細胞生長狀態良好時，可進行細胞凍存。貼壁細胞凍存時，棄去培養基后加入少量胰酶，細胞變圓脫落后，進行離心收集，1000RPM條件下離心8-10分鐘，去除上清，按凍存數量加入血清及DMSO，凍存比例為90%FBS+10%DMSO。

PS：若客戶收到2ml小管細胞，收到細胞后，用75%酒精噴灑整個管子消毒后放到超凈臺或安全柜內，嚴格無菌操作；將小管細胞轉移至T25培養瓶或6cm培養皿，加入5ml左右*培養基混勻，放入培養箱過夜培養后查看細胞密度：若密度未超過80%，換液繼續培養，視情況傳代或者凍存。若密度超過80%，可直接進行傳代（方法同上）。

慧穎生物是一家專業從事細胞培養相關產品的公司，擁有獨立細胞房（可隨時約定參觀），供應胎牛血清，無血清細胞凍存液，無血清培養基，常規培養基，胰酶，雙抗，*培養基，STR鑒定細胞，感受態細胞等，專業，專注，性價比高，是您Shou選之家。

熱賣細胞：

貨號    簡稱    中文名稱    培養條件    特性    形態

H001    HeLa    人宮頸癌細胞    DMEM+10% FBS    貼壁    上皮細胞樣

H002    143B    人骨肉瘤細胞    DMEM+10% FBS    貼壁    上皮細胞樣

H003    293T    人胚腎細胞 DMEM+10% FBS    貼壁    上皮細胞樣

H004    A2780   人卵巢癌細胞    RPMI-1640+10% FBS   貼壁    上皮細胞樣

H005    A549    人非小細胞肺癌細胞  RPMI-1640+10% FBS   貼壁    上皮細胞樣

H006    A673    人尤因肉瘤細胞  DMEM+10% FBS    貼壁    多邊形

H007    AGS 人胃腺癌細胞    RPMI-1640+10% FBS   貼壁    上皮細胞樣

H008    BGC823  人胃腺癌細胞(低分化)    RPMI-1640+10% FBS   貼壁    上皮細胞樣

H009    C33A    人宮頸癌細胞    DMEM+10% FBS    貼壁    上皮細胞樣

H010    CACO2   人結直腸腺癌細胞    DMEM+20% FBS    貼壁    上皮細胞樣

H011    COLO205 人結腸癌細胞    RPMI-1640+10% FBS   半懸浮  上皮細胞樣

H012    DU145   人前列腺癌細胞  DMEM+10% FBS    貼壁    上皮細胞樣

H013    ES-2    人卵巢透明細胞癌細胞    McCoy's +10%FBS   貼壁    上皮細胞樣

H014    H1650   人非小細胞肺癌細胞  RPMI-1640+10% FBS   貼壁    上皮細胞樣

H015    H460    人大細胞肺癌細胞    RPMI-1640+10% FBS   貼壁    上皮細胞樣

H016    HACAT   人永生化角質形成細胞    DMEM+15% FBS    貼壁    上皮細胞樣

H017    HCT116  人結腸癌細胞    McCoy's +10%FBS   貼壁    上皮細胞樣

H018    HEK293  人胚腎細胞 DMEM+10% FBS    貼壁    上皮細胞樣

H019    HEPG2   人肝癌細胞  DMEM+10% FBS    貼壁    上皮細胞樣

H020    HGC27   人胃癌細胞(未分化)  DMEM+10% FBS    貼壁    上皮細胞樣

H021    HT-29  人結腸癌細胞    McCoy's +10%FBS   貼壁    上皮細胞樣

H022    HUVEC   人臍靜脈內皮細胞    ECM 貼壁    上皮細胞樣

H023    KYSE150 人食道癌細胞    RPMI-1640+10% FBS   貼壁    上皮細胞樣

H024    L02(HL7702)(QSG-7701)   人正常肝細胞    RPMI-1640+20% FBS   貼壁    上皮細胞樣

H025    LOVO    人結腸癌細胞    F12K+10% FBS    貼壁    上皮細胞樣

H026    MCF-10A 人正常乳腺上皮細胞  DMEM/F12(1:1) 培養基+胰島素(10ug/ml)+表皮生長因子(20ng/ml)+100ng/ml霍亂病毒 +5% 馬血清   貼壁    上皮細胞樣

H027    MCF7   人乳腺癌細胞    DMEM+10% FBS+10μg/ml 胰島素    貼壁    上皮細胞樣

H028    LX-2    人肝星狀細胞    DMEM+10% FBS    貼壁    上皮細胞樣

H029    MDA-MB-468  人乳腺癌細胞    L-15+10% FBS    貼壁    上皮細胞樣

H030    MIA Paca2   人胰腺癌細胞    DMEM+10% FBS    貼壁    上皮細胞樣 少量圓形懸浮

H031    NCI-H1299   人非小細胞肺癌細胞 RPMI1640+10%FBS 貼壁    上皮細胞樣

H032    PANC-1  人胰腺癌細胞    DMEM+10% FBS    貼壁    上皮細胞樣

H033    RBE 人肝膽管癌細胞 DMEM+10%FBS 貼壁    上皮細胞樣

H034    SAOS-2  人成骨肉瘤細胞 McCoy's +15%FBS   貼壁    上皮細胞樣

H035    SiHa    人子宮頸鱗癌細胞    DMEM+10% FBS    貼壁    上皮細胞樣

H036    NB 4    急性早幼粒細胞白血病細胞    RPMI-1640+10% FBS   懸浮    圓形

H037    SPC-A-1 人肺腺癌細胞    DMEM+10% FBS    貼壁    上皮細胞樣

H038    SW480   人結腸癌細胞    L-15+10% FBS    貼壁    上皮細胞樣

H039    U-87MG 人腦星形膠質母細胞瘤細胞    DMEM+10% FBS    貼壁    上皮細胞樣

H040    ZR-75-1 人乳腺癌細胞    RPMI-1640+10% FBS   貼壁    上皮細胞樣

H041    SW1116  人結腸腺癌細胞  L-15+10% FBS    貼壁    上皮細胞樣

H042    293A    人胚腎細胞  DMEM+10% FBS    貼壁    上皮細胞樣

H043    SGC-7901    人胃腺癌細胞    RPMI-1640 +10% FBS  貼壁    上皮細胞樣

H044    Ishikawa    人子宮內膜癌細胞    DMEM+10% FBS    貼壁    上皮細胞樣

H045    Eca-109 人食管癌細胞    RPMI-1640+10% FBS   貼壁    上皮細胞樣

H046    RD-ES   人尤文氏肉瘤    RPMI-1640+15% FBS   貼壁    上皮細胞樣

H047    NCI-H1437   人肺癌細胞  RPMI-1640+10% FBS   貼壁    上皮細胞樣

H048    HOS     人骨肉瘤細胞    DMEM+10% FBS    貼壁    上皮細胞樣

H049    Hela S3 人宮頸癌細胞    F12K+10% FBS    貼壁    上皮細胞樣

H050    ECC1    人宮頸內膜腺癌細胞  DMEM+10% FBS    貼壁    上皮細胞樣

H051    SUP-B15     人Ph+急淋白血病細胞系   IMDM+20% FBS    懸浮    淋巴母細胞樣

H052    TF-1    人血液白血病細胞    RPMI1640+ 10% FBS+2ng/mL 重組人GM-CSF   懸浮    淋巴母細胞樣

H053    NCI-H446    人小細胞肺癌細胞    RPMI-1640+10% FBS   貼壁    上皮細胞樣

H054    GES-1   人胃正常黏膜上皮細胞    RPMI-1640+10% FBS   貼壁    上皮細胞樣

H055    IOSE80 人卵巢正常上皮細胞株    RPMI-1640+10% FBS   貼壁    上皮細胞樣

H056    GIST882 人胃腸道間質瘤細胞  RPMI-1640+10% FBS   貼壁    上皮細胞樣

H057    KGN 人卵巢顆粒細胞癌    DMEM/F12(1:1)+10% FBS   貼壁    上皮細胞樣

H058    U937    人組織細胞淋巴瘤細胞    RPMI-1640 +10% FBS  懸浮    單核細胞樣

H059    SV-HUC-1    人膀胱上皮永生化細胞    F12K+10% FBS    貼壁    上皮細胞樣

H060    tpc-1   人乳頭瘤狀甲狀腺癌細胞  F12K+10% FBS    貼壁    上皮細胞樣

H061    hela-luci   Luciferase穩定表達Hela細胞 DMEM(L)+10% FBS 貼壁    上皮細胞樣

H062    colo320 人結腸癌細胞    RPMI-1640+10% FBS   半懸浮  圓形

H063    bxpc-3  人胰腺腺癌細胞  RPMI-1640+10% FBS   貼壁    上皮細胞樣

H064    raji    人Burkitt's淋巴瘤細胞  RPMI-1640+10% FBS   懸浮    淋巴母細胞樣

H065    5637    人膀胱癌細胞    RPMI-1640+10% FBS   貼壁    上皮細胞樣

H066    chang-liver 人肝細胞(已被hela污染）    DMEM(L)+10% FBS 貼壁    上皮細胞樣

H067    a549-gfp    gfp標記的A549細胞  F12K+10% FBS    貼壁    上皮細胞樣

H068    hs578.t 人乳腺癌細胞    DMEM+10% FBS+10μg/ml 胰島素    貼壁    上皮細胞樣

H069    T24 人膀胱移行細胞癌細胞    McCoy's +15%FBS   貼壁    上皮細胞樣

H070    K562    人慢性髓系白血病細胞    IMDM+10% FBS    懸浮    淋巴母細胞樣

H071    EH-GB1  人膽囊癌細胞（表達GFP和RED2）  DMEM+15% FBS    貼壁    上皮細胞樣

H072    skov-3  人卵巢腺癌細胞  McCoy's +15%FBS   貼壁    上皮細胞樣

H073    ECV304  人膀胱癌細胞（T24衍生物）   M199+20%FBS 貼壁    上皮細胞樣

H074    nci-n87 人胃癌細胞  RPMI-1640+10% FBS   貼壁    上皮細胞樣

H075    B-CPAP  人甲狀腺癌細胞  RPMI-1640+10% FBS   貼壁    上皮細胞樣

H076    NCI-H1975   人非小細胞肺腺癌細胞    RPMI-1640+10% FBS   貼壁    上皮細胞樣

H077    HK-2    人腎皮質近曲小管上皮細胞    DMEM/F12(1:1)+10% FBS   貼壁    上皮細胞樣

H078    J82 人膀胱癌細胞    DMEM(L)+10% FBS 貼壁    上皮細胞樣

H079    A431    人皮膚鱗癌細胞  DMEM+10% FBS    貼壁    上皮細胞樣

H080    MG63    人骨肉瘤細胞    DMEM(L)+10% FBS 貼壁    上皮細胞樣

H081    SW48    人結腸癌細胞    DMEM+10% FBS    貼壁    上皮細胞樣

H082    ME180   人宮頸表皮樣癌  McCoy's +10%FBS   貼壁    上皮細胞樣

H083    hepaRG-GFP  Gfp標記的人肝癌細胞 DMEM(L)+10% FBS 貼壁    上皮細胞樣

H084    BEAS-2B 人正常肺上皮細胞    DMEM+10% FBS    貼壁    上皮細胞樣

H085    THP-1  ATCC：TIB-202    人髓系白血病單核細胞    RPMI-1640+10% FBS   懸浮    單核細胞樣

H086    PC9 人肺癌細胞  DMEM+10% FBS    貼壁    上皮細胞樣

H087    Fadu    人咽鱗癌細胞    DMEM(L)+10% FBS 貼壁    上皮細胞樣

H088    Huh7    人肝癌細胞  DMEM+10% FBS    貼壁    上皮細胞樣

H089    Hcc9810 人肝癌細胞  RPMI-1640+10% FBS   貼壁    上皮細胞樣

H090    Jurkat cloneE6-1    人急性T淋巴細胞白血病細胞  RPMI-1640+10% FBS   懸浮    淋巴母細胞樣

H091    KBM-7   人慢性粒細胞白血病細胞  IMDM+10% FBS    懸浮    圓形

H092    GBC-SD  人膽囊癌細胞    RPMI-1640+10% FBS   貼壁    上皮細胞樣

H093    JEKO-1  人套細胞淋巴癌細胞  RPMI-1640+20% FBS   懸浮    圓形

H094    CAL27   人口腔鱗癌  DMEM+10% FBS    貼壁    上皮細胞樣

H095    DB  彌漫大B細胞淋巴瘤細胞  RPMI-1640+10% FBS   懸浮    淋巴母細胞樣

H096    hne1-lmp1   轉入LMP1基因人鼻咽癌細胞   RPMI-1640+10% FBS   貼壁    上皮細胞樣

H097    nci-h226    人肺鱗癌細胞    RPMI-1640+10% FBS   貼壁    上皮細胞樣

H098    hepg2.2.15  人肝癌細胞  DMEM+10% FBS    貼壁    上皮細胞樣