AB0血型鑒定的注意事項

   ABO血型系統(tǒng)是*個被發(fā)現(xiàn)的人類血型系統(tǒng)，是臨床輸血工作中首先要鑒定和輸血前必須進(jìn)行交叉配血試驗的血型系統(tǒng)。通常利用RBC凝集試驗，通過正反定型準(zhǔn)確鑒定ABO血型。

1  ABO血型正反定型及結(jié)果

1．1  正定型  用已知抗-A和抗-B分型血清來測定RBC上有無相應(yīng)的A抗原或／和B抗原。

1．2  反定型  用已知A細(xì)胞和B細(xì)胞來測定血清中有無相應(yīng)的抗-A或／和抗-B。

2正反定型注意事項

1. 更換新批號抗血清或?qū)υ囼炗袘岩蓵r，可設(shè)陽性、陰性和自身對照。抗A管的陽性對照用抗A標(biāo)準(zhǔn)血清加已知A型RBC；抗B管的陽性對照用抗B標(biāo)準(zhǔn)血清加已知B型RBC；陰性對照用AB型血清加正常人0型RBC；自身對照用被檢者血清加被檢者RBC。抗血清與5％RBC生理鹽水懸液加入量及操作步驟與正定型試驗相同。判斷結(jié)果時，首先看對照管，當(dāng)陽性對照管陽性，陰性對照管陰性，自身對照管陰性時，測定管的結(jié)果才可信。否則必須查找原因。(2)為避免交叉污染，尖吸管、玻棒只能一次性使用。RBC懸液濃度過高或離心力過大可造成假凝集，操作時須注意。操作環(huán)境應(yīng)在20—25℃下進(jìn)行。操作中心嚴(yán)格查對制度，觀察后要立即正確記錄結(jié)果。(3)嬰幼兒RBC抗原末發(fā)育*，老年體弱者抗原較弱，用試管法鑒定。白血病、惡性腫瘤等嚴(yán)重疾病時RBC上的抗原可能減弱甚至消失，要結(jié)合反定型綜合判斷結(jié)果。亞型RBC(如A3型)的抗原性較弱有時會出現(xiàn)混合外觀，甚至與較低效價的血清抗體不出現(xiàn)凝集反應(yīng)，要用抗-(A+B)標(biāo)準(zhǔn)血清進(jìn)行鑒定。(4)被檢RBC異常：如弱A或弱B亞型，白血病時可使A或B抗原減弱而誤定為0型；霍奇金病也有類似白血病的情況，獲得性B或A表現(xiàn)等。(5)有些疾病可能使RBC定型困難。①嚴(yán)重腸道細(xì)菌感染，其代謝產(chǎn)物使RBC出現(xiàn)類B現(xiàn)象與抗-B血清出現(xiàn)假凝集。②嚴(yán)重細(xì)菌感染，可激活正常存在于RBC上T抗原，與各型血清中正常存在的抗-T反應(yīng)，出現(xiàn)全凝集現(xiàn)象。⑦血清中存在病理性冷凝集素與RBC上抗原結(jié)合，干擾血型鑒定。④部分高球蛋白和異常高球蛋白血癥患者(如慢性肝病、多發(fā)性骨髓瘤)RBC血型鑒定困難，須加做自身血清、RBC對照，自身RBC、生理鹽水懸液對照以及通過反定型，抗體吸收、放散試驗和血型物質(zhì)型別的鑒定，甚至親屬的血型鑒定等家系調(diào)查分析綜合判斷。(6)輸入異型血或做過與受檢者血型不同的異體骨髓器官移植患者，在血型鑒定時可能出現(xiàn)混合外觀。
2. 反定型注意事項    ①不宜用玻片法，因為獻(xiàn)血者或患者血清有時凝集力較弱，必須經(jīng)過離心使RBC緊密接觸，否則，不足以使RBC凝集。②試管離心后，應(yīng)先觀察上清液有無溶血，然后搖動底層RBC進(jìn)行觀察，若出現(xiàn)溶血現(xiàn)象表明存在抗原抗體反應(yīng)并有補體激活，應(yīng)視為凝集。因為患者新鮮血清作反定型時，由于補體作用發(fā)生溶血，如不檢查有無溶血現(xiàn)象，會使結(jié)果判斷錯誤或遺漏。⑦反定型必要時加一管“0"型RBC，用以查出盂買型抗-h抗體，同時可查是否有緡錢狀形成和血清中偶可見到的少數(shù)與血型抗原無關(guān)但能使陽比發(fā)生凝集的物質(zhì)。④老年人、白血病患者、骨髓移植患者、先天性免疫球蛋白缺陷、長期大量應(yīng)用免疫抑制劑，血型抗體可減弱或消失，造成反定型困難。⑤血清中存在免疫性血型抗體，冷凝集素效價增高，多發(fā)性骨髓瘤免疫球蛋白異常均可造成反定型困難。⑧新生兒、4—6M內(nèi)嬰兒反定型時，可能不凝集或凝集很弱，且新生兒抗體多來自母親，自身抗體效價又很低，故反定型意義不大。4正反定型結(jié)果不一致常見情況    ①分型血清效價太低，親和力不強。如抗-A血清效價不高，可將A型誤定為0型。分型血清未滅活產(chǎn)生溶血，血型鑒定時誤認(rèn)為陰性。②RBC懸液過濃、過淡，抗原抗體比例不適當(dāng)，使反應(yīng)不明顯出現(xiàn)假陰性。③受檢者RBC上抗原位點太少或抗原性減弱以及類B或cisAB等。④受檢者血清中缺乏應(yīng)有的抗-A、抗-B。⑤各種原因引起的RBC溶解，誤判為不凝集，部分溶血時可溶性血型物質(zhì)中和了相應(yīng)的抗體。⑥受檢者血清中蛋白紊亂或?qū)嶒炇覝囟冗^高，常引起RBC呈緡錢狀排列。⑦細(xì)茵污染或遺傳因素引起多凝集或全凝集往往是正反定型不符的原因。⑧血清中有意外抗體如自身抗-I，存在免疫性抗體如抗-PI、抗-M、抗-H等常干擾試驗。⑨新生兒、老年人、低免疫球蛋白血癥患者的血清中的抗-A、抗-B效價太低甚至缺乏，可出現(xiàn)正反定型不一致。⑩非特異性反應(yīng)：被檢血清中可出現(xiàn)與血型無關(guān)的，同部分人血細(xì)胞均可發(fā)生凝集樣反應(yīng)的現(xiàn)象，可能系免疫性抗體所致。5  正反定型結(jié)果不一致的處理方法    (1)首先重復(fù)試驗一次，嚴(yán)格操作規(guī)程，使用合格的試劑及細(xì)心觀察和解釋結(jié)果，可解決明顯的問題。(2)另從受檢者采取一份新鮮血標(biāo)本，可糾正因污染或搞錯標(biāo)本造成的不符。(3)將RBC洗滌數(shù)次，配成5％鹽水細(xì)胞懸液，用抗-A、抗-B、抗-A1、抗-(A+B)及抗-H做試驗可以得到其它有用的信息。(4)對受檢者RBC作直接抗人球蛋白試驗，如結(jié)果呈陽性，表示RBC已被抗體致敏。(5)用A1、A2、B、0型RBC及自身RBC檢查受檢血清。加懷疑是抗-I，用0型(或ABO相合的)臍血RBC檢查。(6)若試驗結(jié)果未見凝集，應(yīng)將細(xì)胞及血清試驗至少在室溫和4℃放置30min，用顯微鏡核實。(7)如疑為A抗原或B抗原減弱，則可將受檢RBC與抗-A或抗-B血清作吸收及放散試驗以及受檢者唾液作A、B、H血型物質(zhì)測定。后者只對80％HAB分泌型的人有用。(8)若試驗結(jié)果RBC呈緡錢狀排列，加等滲鹽水1滴混合，往往可使緡錢狀消失。應(yīng)注意不應(yīng)先加鹽水1滴于受檢者血清中而后和陽比試驗，以免使血清中抗體被稀釋。(9)如受檢者為A型血而疑為有類B抗原時，可用下列方法進(jìn)行鑒定。①觀察細(xì)胞與抗-A及抗-B的凝集強度，與抗-A的反應(yīng)要比抗-B的反應(yīng)強。這種區(qū)別用玻片法作試驗更為明顯。②用受檢者RBC與自身血清試驗，血清中的抗-B不凝集自身RBC上的類B抗原。②檢查唾液中是否有A、B物質(zhì)，若是分泌型，可檢出A物質(zhì)而無B物質(zhì)。④核對患者的診斷，類B抗原的形成與結(jié)腸癌、直腸癌、革蘭陰性桿菌感染有關(guān)。⑤如發(fā)現(xiàn)多凝集現(xiàn)象，應(yīng)考慮由遺傳產(chǎn)生的Cad抗原活性，被細(xì)菌酶激活的T或TK受體；或產(chǎn)生機制不太明了的Tn受體所引起。可用經(jīng)過T激活的RBC吸收過(除去抗-T)的抗-A或抗-B血清加以檢查。