庫存現(xiàn)貨：人胃癌細胞，MKN-45細胞，報價/傳代 全國各地均可發(fā)貨，全國統(tǒng)一價格

產品名稱：MKN-45細胞

中文名稱：人胃癌細胞

來源：人胃癌

形態(tài)特性：上皮樣

生長特性：貼壁生長

培養(yǎng)基：RPMI-1640 90%, Fetal Bovine Serum 10%

培養(yǎng)條件：37℃ 5% CO2

消化條件：0.25% (w/v) Trypsin-0.53mM EDTA溶液，消化5-10min

傳化比例：1：4 -1：6

換液時間：2-3天換液一次

凍存液比例：85%培養(yǎng)基，10%FBS, 5% (v/v) DMSO

凍存密度：1-3 ×10^6/管，液氮保存

凍存密度：1-3 ×10^6/管，液氮保存保存

細胞活力：90％（ViabilitybyTrypanBlueExclusion）

細胞檢測：細胞不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細菌、酵母和真菌

慧穎生物提供400多種細胞系細胞株,以及相應的細胞學實驗服務:血管新生、traswell、劃痕實驗、細胞遷移、克隆形成、細胞凋亡、細胞增殖、細胞周期等。另有：示蹤細胞、穩(wěn)定細胞株構建、細胞代感染、篩藥細胞株產品、篩藥細胞株定制、pathway研究細胞、STR分型鑒定，細胞染色等技術服務提供。咨詢： ！

人胃癌細胞，MKN-45細胞，報價/傳代   細胞傳代培養(yǎng)技術：

細胞復蘇

1. 將凍存的細胞取出后迅速放入37℃水浴中，并不時搖動，在一分鐘內使其*融化

2.將細胞吸出放入有培養(yǎng)基的離心管中中，用滴管輕輕吹打混勻，800轉/min，5分鐘離心；棄去上清液，加入培養(yǎng)基，混勻再離心一次，棄液，加入4~5ml 培養(yǎng)基，混勻，移入培養(yǎng)瓶中

細胞換液

1.用舊液體輕輕沖洗培養(yǎng)瓶底，然后用滴管吸盡舊液（棄去）

2.加入PBS1~2ml，輕輕搖晃，然后用滴管吸盡舊液（棄去）

3.如果細胞液比較臟，可以重復步驟2

4.加入新培養(yǎng)基，輕輕搖勻，放入培養(yǎng)箱繼續(xù)培養(yǎng)

細胞傳代

1.用舊液體輕輕沖洗培養(yǎng)瓶底，然后用滴管吸盡舊液（棄去）

2.加入PBS1~2ml，輕輕搖晃，然后用滴管吸盡舊液（棄去）

3.加入約1~1.5ml胰酶，室溫或培養(yǎng)箱中放置4~5分鐘，直到所有貼壁細胞消化下來為止【判斷方法：倒置相差顯微鏡觀察，細胞變圓時就可以終止消化】

4.加入約1ml培養(yǎng)基（含有小牛血清）終止消化

5.用滴管吹洗一次，移入離心管, 800轉/min，5分鐘離心

6.加入培養(yǎng)基，吹打分散細胞，再根據分傳細胞瓶數(shù)補加一定量的含血清的培養(yǎng)基，制成細胞懸液；分裝至2~3個培養(yǎng)瓶中

7.放入培養(yǎng)箱進行培養(yǎng)

細胞計數(shù)

1.準備好顯微鏡、載玻片、蓋玻片、血細胞計數(shù)板、吸管等儀器設備

2.按照“細胞傳代”中講述的方法制成細胞懸液

3.將細胞懸液取出若干，滴入血細胞計數(shù)板，注意不要有氣泡進入

4.加樣后靜置2~3min后觀察，數(shù)四角大格內的細胞總數(shù)。計數(shù)時應按照一定的路徑，以免遺漏或重復。細胞壓線時計上不計下，計左不計右，計數(shù)2~3次，取平均值

5. 細胞密度 = 四大格中細胞總數(shù)÷4 ×104 = 細胞數(shù)/ml懸液

細胞凍存

1. 重復“細胞傳代”中的消化細胞的步驟，將細胞消化下來，轉移至離心管800轉/min，5分鐘離心，棄液

2. 沉淀中加入凍存液，輕吹制成懸液

3. 分轉到凍存管內，每個1~1.5ml

4. 將凍存管口封嚴

5.貼上標簽，注明凍存時間、細胞種類及代數(shù)

6. 按下列順序降溫，并zui終凍存：室溫→ 4℃ 20min → -20℃ 30min →-70℃凍存

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